充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）作為再生醫(yī)學(xué)的“明星選手”，其培養(yǎng)質(zhì)量直接決定實(shí)驗(yàn)成敗！而培養(yǎng)基的選擇與操作更是核心中的核心。針對(duì)高頻痛點(diǎn)，我們整理了一份超實(shí)用指南，助你避開培養(yǎng)雷區(qū)！

01Q:基礎(chǔ)培養(yǎng)基怎么選？DMEM/F12、α-MEM還是低糖DMEM？
A:沒有絕對(duì)最優(yōu)，關(guān)鍵看細(xì)胞來源和應(yīng)用場(chǎng)景！
骨髓/脂肪來源MSC：經(jīng)典選擇α-MEM（含核苷/維生素，促增殖）
臍帶/胎盤來源MSC：傾向低糖DMEM（更貼近生理微環(huán)境）
需神經(jīng)/成骨分化：可選DMEM/F12（營(yíng)養(yǎng)更均衡）

02Q:血清必須用胎牛血清（FBS）嗎？能用替代品嗎？
A:FBS仍是主流，但無血清培養(yǎng)是趨勢(shì)！

重要提示
若用FBS，必須熱滅活（56℃ 30min）以消除補(bǔ)體影響；轉(zhuǎn)換無血清培養(yǎng)時(shí)，需梯度適配（按比例混合新舊培養(yǎng)基過渡）。

03Q:培養(yǎng)基多久換液一次？顏色變黃就要換嗎？
A:看細(xì)胞密度，別只看顏色！
活躍增殖期（＜80%密度）：每2-3天換液（即使未變黃）；
高密度/靜止期（＞90%）：每天換液（避免代謝廢物堆積）；
急救場(chǎng)景（pH驟降變橙黃）：立即換液+檢查CO?濃度！
進(jìn)階技巧
換液前輕晃培養(yǎng)瓶，觀察細(xì)胞貼附穩(wěn)定性——若大量漂浮，警惕污染或消化過度！

04Q:添加劑（bFGF、EGF等）怎么加？現(xiàn)用現(xiàn)配嗎？
A:生長(zhǎng)因子必須分裝凍存，避免反復(fù)凍融！
配制貼士
用含0.1% BSA的PBS溶解生長(zhǎng)因子（減少吸附損失）；
分裝單次用量（如bFGF按5-10ng/ml，每支裝50μl），-80℃保存；
使用前融化后4℃暫存≤1周。

05Q:培養(yǎng)的MSC突然不貼壁/分化異常，是培養(yǎng)基的鍋嗎？
A:可能！但需系統(tǒng)排查→ 按此順序自檢：
1. 培養(yǎng)基：
是否新開瓶？檢測(cè)pH值（正常：7.2-7.4）
添加劑是否失活？（換新批次驗(yàn)證）
2. 操作因素：
消化時(shí)間是否過長(zhǎng)？（理想狀態(tài)：細(xì)胞邊緣卷曲即終止）
傳代比例是否過低？（MSC推薦1:2~1:3，高代次勿低于1:4）
3. 環(huán)境控制：
CO?濃度是否偏離5%？
水盤是否干涸導(dǎo)致濕度不足？

埃澤思生物依托其獨(dú)特的技術(shù)平臺(tái)，開發(fā)了大量細(xì)胞治療和醫(yī)藥生產(chǎn)用的高值培養(yǎng)基類產(chǎn)品，目前核心產(chǎn)品超過60種，并可實(shí)現(xiàn)定制開發(fā)及生產(chǎn)。其中核心產(chǎn)品已經(jīng)完成美國(guó)FDA DMF備案以及國(guó)家藥品評(píng)審中心（CDE）藥物原輔料備案，是國(guó)內(nèi)資質(zhì)較為齊全的細(xì)胞治療原料供應(yīng)商。

產(chǎn)品推薦
增強(qiáng)型人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基（AC-1001009）

1.高效增殖能力、明顯降低單位細(xì)胞生產(chǎn)成本；
2.傳代20代，細(xì)胞依然保持良好的形態(tài)與分化能力；
3.無動(dòng)物源，成分確定，可以明顯減少批間差異，確保每一批次產(chǎn)品的高效能和穩(wěn)定性；
4.符合細(xì)胞藥物研發(fā)標(biāo)準(zhǔn)，可以進(jìn)行藥物研發(fā)申報(bào)。

數(shù)據(jù)展示
1.卓越的增殖能力

埃澤思增強(qiáng)型人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(hMSC Medium Plus)在3天內(nèi)顯著提高了細(xì)胞增殖率，細(xì)胞數(shù)量達(dá)競(jìng)品的兩倍

2.穩(wěn)定傳代，持久效能

埃澤思增強(qiáng)型人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(hMSC Medium Plus)經(jīng)過嚴(yán)格的測(cè)試可以穩(wěn)定傳代20代，并且保持著卓越的增殖和分化能力。

3.流式檢測(cè)

埃澤思增強(qiáng)型人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(hMSC Medium Plus)能夠穩(wěn)定維持高代次陽性標(biāo)志物在98%以上。圖為P12代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)記物的檢測(cè)。

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