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QCM-D解析姜黃素-肌原纖維蛋白核殼顆粒增強透明質(zhì)酸吸附_abio生物試劑品牌網(wǎng)

abiopp3個月前 (06-27)技術(shù)25
用戶成果|南京農(nóng)業(yè)大學王鵬團隊Food Hydrocolloids:應(yīng)用QCM-D與分子模擬解析姜黃素-肌原纖維蛋白核殼納米顆粒增強透明質(zhì)酸吸附機制
 
   
背景知識:姜黃素遞送的“難”與“解”


姜黃素是姜黃中的天然多酚,具有抗炎、抗氧化等多重健康功效,卻因水溶性差、易降解、生物利用度低,在食品和醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用受限。如何設(shè)計高效遞送系統(tǒng),成為科研界的熱點。

蛋白-多糖核殼納米顆粒被視為理想載體:蛋白(如肌原纖維蛋白,MP)提供疏水內(nèi)核包裹姜黃素,多糖(如透明質(zhì)酸,HA)形成親水外殼,既能提升穩(wěn)定性,又能通過多糖的生物相容性實現(xiàn)靶向遞送。但關(guān)鍵問題在于:姜黃素如何改變蛋白構(gòu)象,進而影響多糖的吸附效率?這一過程的分子機制是什么?近期南京農(nóng)業(yè)大學王鵬團隊以“Core–shell nanoparticle: curcumin-induced protein conformation changes enhance the adsorption of hyaluronic acid, as studied via spectroscopy, molecular dynamics simulation and energy dissipation“為題,在《Food Hydrocolloids》上發(fā)表了相關(guān)研究進展。

研究方法:多技術(shù)聯(lián)用破解核殼組裝密碼

團隊以肌原纖維蛋白為基質(zhì),通過pH-shifting法(堿性條件下蛋白展開呈熔融球狀包裹姜黃素)制備MP-姜黃素納米顆粒(PC),再通過自組裝在PC表面包裹HA,形成核殼結(jié)構(gòu)(PCH)。結(jié)合光譜技術(shù)(UV-Vis、熒光、圓二光譜傅里葉紅外光譜QSense耗散型石英晶體微天平(QCM-D)分子動力學模擬(MD),從宏觀到微觀揭示組裝機制:
  • QCM-D:實時監(jiān)測具有不同蛋白結(jié)構(gòu)的PC顆粒在HA表面的吸附過程,通過頻率(Δf)和耗散(ΔD)變化量化吸附量與層結(jié)構(gòu);
  • 光譜分析:追蹤姜黃素與蛋白/多糖的相互作用(如熒光淬滅反映結(jié)合位點,CD反映蛋白二級結(jié)構(gòu)變化);
  • 分子模擬:從原子尺度解析氫鍵作用的具體位點以及體系穩(wěn)定性。
實驗結(jié)果與分析:核殼結(jié)構(gòu)的“三大優(yōu)勢”

1. 溶解度與穩(wěn)定性雙提升

PCH納米顆粒的蛋白溶解度較PC顆粒提高。PCH在14天存儲后沉淀較少,而PC因姜黃素誘導(dǎo)易發(fā)生疏水聚集。HA作為“殼”像“防護罩”,屏蔽姜黃素的疏水位點,使得姜黃素介導(dǎo)的PC納米顆粒之間的聚集和沉淀顯著降低。Turbiscan穩(wěn)定性指數(shù)(TSI)顯示,PCH穩(wěn)定性較好。
 
  
2. 姜黃素包封效率突破
 

PCH的前四組包封率(EE)達80%以上。與PC納米顆粒相比,PCH納米顆粒的EE隨著HA的摻入而增加。HA的加入不僅“鎖住”更多姜黃素,還通過氫鍵增強姜黃素與蛋白的結(jié)合(結(jié)合常數(shù)Ka從6.76×10?升至8.63×10?),給姜黃素提供更疏水的微環(huán)境(UV-Vis紅移證實)。
 
 
3. 構(gòu)象變化驅(qū)動吸附增強
  • 蛋白“變形記”:CD光譜表明與PC相比,PCH中α-螺旋的含量增加,β-折疊的含量減少,說明HA的添加改變了蛋白的構(gòu)象;
  • 實時吸附:QCM-D結(jié)果顯示,PC的Δf(頻率下降)和ΔD(耗散增加)顯著高于純蛋白,表明姜黃素誘導(dǎo)的蛋白構(gòu)象變化顯著增強了PC的吸附量(PC3組厚度達12.8 nm,是純蛋白的2.8倍);
  
  • 分子“鎖鑰”機制:MD模擬證實,HA與蛋白通過多位點氫鍵(如HA的羥基與蛋白的Lys、Asn殘基)緊密結(jié)合,體系自由能(ΔG)從-20.96 kcal/mol降至-36.35 kcal/mol,穩(wěn)定性大幅提升。
 
結(jié)論與展望:從機制到應(yīng)用的“跨越”
 

本研究證實,MP與姜黃素結(jié)合后的構(gòu)象發(fā)生改變(二級結(jié)構(gòu)與三級結(jié)構(gòu)),并增強了HA與MP-姜黃素的吸附和相互作用,形成的核殼結(jié)構(gòu)(PCH)在蛋白溶解度、穩(wěn)定性、包封率三方面表現(xiàn)優(yōu)異。這一發(fā)現(xiàn)為設(shè)計高效姜黃素遞送系統(tǒng)提供了新思路——通過“蛋白-多酚-多糖”協(xié)同作用,精準調(diào)控納米顆粒的組裝與功能
 
基金支持
 

本研究獲國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-41)、國家自然科學基金(32172243)等項目資助。

原文鏈接
https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2025.111645

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