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豬輪狀病毒VP7蛋白的核心功能、特性與應(yīng)用介紹_abio生物試劑品牌網(wǎng)

abiopp3個(gè)月前 (07-02)技術(shù)32

豬輪狀病毒(Porcine Rotavirus,PRV)VP7 蛋白是輪狀病毒外層衣殼的主要結(jié)構(gòu)蛋白,由病毒基因組第 7、8 或 9 節(jié)段(不同毒株節(jié)段編號(hào)可能不同)編碼,是決定病毒血清型(G 型)的關(guān)鍵抗原,在病毒入侵宿主細(xì)胞免疫原性及疫苗研發(fā)中具有核心地位。

一、基本信息
蛋白名稱:豬輪狀病毒 VP7 蛋白(Porcine Rotavirus VP7 Protein)
基因來源:PRV 基因組的第 7-9 節(jié)段(雙鏈 RNA),不同毒株的編碼節(jié)段存在差異。
蛋白定位:位于輪狀病毒三層衣殼的最外層,是病毒粒子表面的主要糖蛋白。
分子特征:
分子量約為 38-42 kDa,屬于糖蛋白,存在 N - 糖基化修飾。
序列變異性較高,根據(jù)其抗原性差異可將輪狀病毒分為不同 G 血清型(如 G1-G27 等),豬輪狀病毒常見血清型包括 G3、G4、G5、G9 等。

二、核心功能特性
病毒入侵宿主細(xì)胞
VP7 蛋白通過與宿主腸道上皮細(xì)胞表面的受體(如唾液酸、整合素等)結(jié)合,介導(dǎo)病毒粒子吸附并進(jìn)入細(xì)胞,是輪狀病毒感染的關(guān)鍵第一步。
血清型決定因子
VP7 蛋白的抗原表位具有高度特異性,其氨基酸序列的變異直接決定輪狀病毒的 G 血清型,不同 G 型之間的交叉免疫保護(hù)較弱,這也是輪狀病毒感染防控的難點(diǎn)之一。
免疫原性
是誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體的主要靶標(biāo),中和抗體可通過識(shí)別 VP7 的抗原表位,阻斷病毒與宿主細(xì)胞的結(jié)合,從而抑制感染。
其誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答具有型特異性,即針對某一 G 型 VP7 的抗體對其他 G 型病毒的交叉保護(hù)有限。

三、主要應(yīng)用
血清型鑒定與流行病學(xué)調(diào)查
利用 VP7 的型特異性,通過檢測 VP7 基因序列或其誘導(dǎo)的特異性抗體,可對豬輪狀病毒流行毒株進(jìn)行 G 型分型,明確當(dāng)?shù)貎?yōu)勢血清型,為防控策略制定提供依據(jù)。
疫苗研發(fā)
作為主要保護(hù)性抗原,VP7 是單價(jià)或多價(jià)亞單位疫苗的核心成分(如包含流行 G 型的 VP7),誘導(dǎo)針對特定血清型的中和抗體。
在減毒活疫苗或重組疫苗中,VP7 的表達(dá)水平直接影響疫苗的免疫效果。
診斷試劑開發(fā)
針對特定 G 型 VP7 的抗原或抗體,可開發(fā)型特異性 ELISA、膠體金試紙條等檢測工具,用于區(qū)分不同血清型感染,輔助臨床診斷。
基礎(chǔ)研究
用于探究輪狀病毒的宿主嗜性(不同 G 型 VP7 與宿主受體的結(jié)合差異)、病毒變異機(jī)制(如 VP7 基因重組或突變對血清型的影響)等。

四、制備方法
VP7 蛋白可通過多種表達(dá)系統(tǒng)制備,具體流程如下:
基因克?。簭?PRV 陽性樣本中擴(kuò)增特定 G 型的 VP7 基因,插入原核或真核表達(dá)載體(如 pET-28a、桿狀病毒表達(dá)載體)。
蛋白表達(dá):
原核表達(dá)(如大腸桿菌):成本低、產(chǎn)量高,但糖基化修飾缺失可能影響抗原性,需驗(yàn)證其免疫活性。
真核表達(dá)(如昆蟲細(xì)胞、畢赤酵母):可實(shí)現(xiàn)糖基化等翻譯后修飾,更接近天然蛋白的結(jié)構(gòu)和抗原性,適合疫苗或診斷抗原制備。
純化與鑒定:通過親和層析(如 His 標(biāo)簽)純化蛋白,經(jīng) SDS-PAGE 驗(yàn)證分子量,Western blot 或中和試驗(yàn)驗(yàn)證其抗原性和中和活性。

五、研究意義
豬輪狀病毒是仔豬病毒性腹瀉的首要病原之一,而 VP7 蛋白作為其血清型決定因子和主要中和抗原,是理解病毒傳播規(guī)律、開發(fā)精準(zhǔn)診斷工具和高效疫苗的核心靶點(diǎn)。針對優(yōu)勢血清型 VP7 的研究和應(yīng)用,能有效提升豬輪狀病毒感染的防控效率,減少養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟(jì)損失。

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